浏览数量: 0 作者: 本站编辑 发布时间: 2022-05-12 来源: 本站
从核酸提取技术的发展历程来看,核酸提取主要经历了四个发展阶段:
①利用有机溶剂抽提技术的沉淀法。②利用硅胶膜吸附技术的离心柱法。
③利用磁珠吸附技术的磁珠法。④利用离子交换树脂吸附技术的树脂法。
随风而去-沉淀法
优点:处理体积灵活,提取试剂价格较为便宜。
缺点:苯酚、氯仿等试剂毒性较大,污染较严重。实验操作要求高,核酸的回收率较低,很难进行微量化的操作,在实际应用中基本上被淘汰。
柱秀于林-离心柱法
优点:操作流程简便,快速,比传统的有机溶剂提取法获得的核酸纯度高,抑制物少。价格也相对低廉。
缺点:有些试剂有毒性。限于硅胶柱的承载能力,对样本起始量有限制。当投入样本过多(如大块组织)可导致吸附膜堵塞从而面临产量低或污染的风险。
趋势如火-磁珠法
优点:安全无毒、操作简单,易于自动化,微量样本得率较高。自动化工作系统使提取的模式从单一样本类型逐步发展至多样本统一核酸提取类型,能够实现高通量操作,是未来发展趋势之一。
缺点:价格相对稍贵。
绵延如山-离子交换树脂法
优点:提取核酸完整性好,纯度高,适合进行大分子核酸提取,可用于三代测序。
缺点:不适合小片段核酸的提取。
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