浏览数量: 0 作者: 本站编辑 发布时间: 2022-04-11 来源: 本站
一、什么是PCR
PCR是聚合酶链式(Polymerase Chain Reaction)反应的简称,是一种将几个或几十个拷贝数DNA片段扩增至上百万份拷贝的方法,这是迄今为止最为重要的技术之一。PCR技术的影响不仅仅局限于生物科学领域,几乎人人都可以感受到PCR所带来的改变,在亲子鉴定以及犯罪调查中PCR技术便有广泛应用。
PCR可以被认为是与发生在细胞内的DNA复制过程相似的技术,其结果都是以原来的DNA为模板产生新的互补DNA片段。细胞中DNA的复制是一个非常复杂的过程。参与复制的有多种因素。PCR是在试管中进行的DNA复制反应,基本原理与细胞内DNA复制相似,但反应体系相对较简单。
二、PCR的基本原理
PCR的基本原理是以需要扩增的DNA为模板,以一对分别与模板的5′和3′末端相互补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成,重复这一过程,即可使目的DNA片段得到扩增。
三、PCR的基本步骤
PCR的基本步骤包括:① 变性:将反应系统加热至95℃,使模板DNA全部变性变成单链DNA。② 退火:将温度下降至适当温度,使引物与模板DNA退火结合。③ 延伸:将温度升至72℃,DNA聚合酶以DNTP底物催化DNA的合成反应。上述三个步骤称为一个循环,这样的循环重复25~30次,就可以得到大量的目标DNA。
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