浏览数量: 0 作者: 本站编辑 发布时间: 2022-04-27 来源: 本站
蛋白酶K是一种从白色念珠菌分离出来的强力蛋白溶解酶,能消化天然的角蛋白(Keratin),而得名蛋白酶K。它属于丝氨酸蛋白酶SB超家族中的S8家族。蛋白酶K主要的切割位点是脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,具有很高的比活性,是DNA提取的关键试剂,该酶在较广的pH范围(4〜12.5)内及高温(50〜70°C)均有活性,广泛用于质粒或基因组DNA、RNA的分离及提取。
蛋白酶K具有超强的蛋白水解酶活性,活性不受SDS(十二烷基硫酸钠)、尿素、EDTA(乙二胺四乙酸)、盐酸胍、异硫氰酸胍等的抑制,且一定含量的去垢剂还可以增强蛋白酶K的活性。这些特性使得蛋白酶K的应用涉及到人类生活的各个领域。如生物学、医学行业,蛋白酶K应用于常规DNA、RNA提取,原位杂交技术中杂交前标本的处理,其中目前应用最为广泛就是新冠等传染病核酸检测中。蛋白酶K的应用不仅仅局限在医疗诊断及生物学领域,在实现规模化工业生产的前提下,蛋白酶K还可以替代作用范围较窄的其它蛋白酶,应用于皮革工业、食品加工(肉类嫩化)、水类消毒、饲料生产、造纸等行业中。其他的还有酿酒(酒类澄清)、氨基酸制备(降解羽毛)。
目前广泛渗入到我们日常生活中新冠病毒核酸检测中,蛋白酶K一直是非常重要的存在。蛋白酶K是病毒采样液的重要组分,可裂解病毒释放核酸,消除RNase(核酸分解酶)以防止病毒的RNA降解。并且蛋白酶K可以灭活病毒,让病毒的蛋白变性,失去活性而“死掉”,不再有传染性,提高运输和检测阶段的安全性。而在核酸提取过程中,蛋白酶K能降解与核酸结合的蛋白质,促进核酸的分离,对于核酸提取的成功起到关键性作用。
随着新冠疫情的爆发,核酸检测的需求激增,截止2020年六月下旬,中国已经完成了近9000万人次的新冠检测,而在全球范围内,这个数字更加惊人。在核酸提取实验中蛋白酶K的工作浓度大约是50-200 μg/mL,一般情况下,提取一个样本的核酸大约需要100 μg的蛋白酶K ,而在实际使用过程中,为了增加核酸提取效率,经常会将蛋白酶K加量使用。新冠病毒的核酸检测带来了大量的蛋白酶K需求,蛋白酶K原有的供需平衡被迅速打破,蛋白酶K一夜之间成为了重要的防疫物资。在过去,蛋白酶K的知名度远不及它所发挥的作用,这次持续性的疫情,让人们意识到蛋白酶K是如此重要,它是这场人类与病毒的战斗中无名英雄!