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NGS;二代测序;技术原理

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  • 2022-03-18

    边合成边测序——NGS测序原理

    NGS是将DNA随机片段化、加接头,制备测序文库,通过对文库中数以万计的克隆进行延伸反应,检测对应的信号,最终获取序列信息。NGS的核心原理是边合成边测序,如下图分析: 目前市场运用比较广泛的是Illumina公司,将构建好的文库通过碱基互补配对原则连接到专用的芯片Flowcell上,步骤如下:一、Flowcell 8条通道,内表面→化学修饰→2种dna引物→与待测序DNA文库的接头序列相互补→通过共价键连到Flowcell上防止被液体冲掉二、Dna文库:许多个DNA片段,在两头接上了特定的dna接头形成的DNA混合物→两个特点,制作方法→超声波打断基因组DNA,两头用酶补平,用Klenow

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