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NGS；二代测序；技术原理

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  • 2022-03-18

    边合成边测序——NGS测序原理
    边合成边测序——NGS测序原理
    NGS是将DNA随机片段化、加接头，制备测序文库，通过对文库中数以万计的克隆进行延伸反应，检测对应的信号，最终获取序列信息。NGS的核心原理是边合成边测序，如下图分析： 目前市场运用比较广泛的是Illumina公司，将构建好的文库通过碱基互补配对原则连接到专用的芯片Flowcell上，步骤如下：一、Flowcell 8条通道，内表面→化学修饰→2种dna引物→与待测序DNA文库的接头序列相互补→通过共价键连到Flowcell上防止被液体冲掉二、Dna文库：许多个DNA片段，在两头接上了特定的dna接头形成的DNA混合物→两个特点，制作方法→超声波打断基因组DNA，两头用酶补平，用Klenow

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游离DNA提取试剂盒（磁珠法）
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游离DNA（cell-free DNA, cfDNA）是一种由细胞释放到血液中的游离DNA片段，它可以携带来自肿瘤、病原以及胎儿的生物学信息。通过分析cfDNA提供的关键标记物能够达到检测、诊断并监测疾病进展的目的。目前，该技术已广泛应用于肿瘤突变检测、靶向用药指导和预后、病原检测及无创产前筛查等领域。
优质的核酸是基因组学研究的保障。兔牙科技采用超顺磁性磁珠纯化技术，为用户提供了高灵敏的核酸提取方案，轻松实现低浓度的痕量核酸提取。本产品经近千例真实临床样本验证，可从新鲜或冷冻的血浆、血清、胸水、腹水及脑脊液等无细胞体液中提取高质量cfDNA，以供科研及临床体外诊断使用。
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本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的从石蜡包埋组织、石蜡切片组织和石蜡固定样本中提取基因组DNA的方法。石蜡组织经脱蜡处理后，配合高效的裂解试剂释放组织中的DNA，再通过快速磁响应结合到磁珠表面，获取高度纯化的基因组DNA，经数百例真实临床样本验证，可直接用于PCR、qPCR、文库构建等多种下游实验。
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血浆病原游离DNA（mcfDNA）是感染病因诊断的潜在生物标志物，在缺少感染灶样本的情况下，血浆mcfDNA的检测为病原体鉴定带来重 要价值。 本产品采用先进的核酸提取技术，配合超顺磁性磁珠和独特的缓冲液系统，可从新鲜或冷冻血浆中快速提取病原游离DNA，轻松实现低浓度 的痕量核酸提取。本试剂盒提取过程安全无毒，极大程度去除蛋白、脂质及其他杂质，经上百例真实临床样本验证，分离的DNA适用于多种 下游应用，包括PCR、ddPCR、Real-Time PCR、mNGS文库构建等

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本试剂盒适用于多种生物体液样本（如肺泡灌洗液、痰液、脑脊液等）及拭子样本的微生物DNA提取，可兼容上游经过去宿主核酸流程的样本。
兔牙科技采用先进核酸提取技术，配合超顺磁性磁珠和独特缓冲液系统，操作过程安全便捷，能够更大程度去除蛋白、脂质及其他杂质，经上万例真实临床样本验证，分离的DNA适用于多种下游应用，包括PCR、Real-Time PCR、mNGS文库构建等，为科研及临床体外诊断提供高效保障。

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DNA分选与纯化试剂盒（磁珠法）
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BunnyMagTM DNA Clean-up&Size-Selection Beads基于SPRI（固相载体可逆化固定法）顺磁技术，通过调节磁珠和样本的体积比，可以选择性地结合不同大小的核酸片段，满足核酸不同长度范围的选择需求，适用于高通量测序中理想大小DNA片段的纯化和筛选。本产品兼容各品牌DNA、RNA建库试剂盒，能够完美替代目前广泛使用的AMPure XP Beads和AxygenBeads，适用于各类下一代测序平台。
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BunnyQuant™ dsDNA HS检测试剂盒是一种针对双链DNA(dsDNA)特异性检测的荧光定量试剂盒。本产品对dsDNA具有高度选择性，在0.2ng/μL~100ng/μL区间具有良好的线性关系。能够测量包括基因组DNA、游离DNA、PCR扩增产物、测序文库等在内的多个来源dsDNA，检测过程安全、高效，在室温下即可进行，是NGS大规模DNA样品定量的理想选择。
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血浆游离DNA（cell-free DNA, cfDNA）是肿瘤诊断和无创产前筛查的重要检测样本，它的质量会直接影响检测结果的准确性和稳定性。游离DNA样本保存管可直接用于全血的采集、保存和运输，能够有效保护cfDNA不受核酸酶的降解，避免血液有核细胞中基因组DNA的释放，极大地保证了cfDNA的下游应用。
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BunnyMag™血液基因组DNA提取试剂盒（磁珠法）采用兔牙生物科技自主研发的超顺磁性的纳米磁珠，适用于从0.1-1mL新鲜或冷冻的血液、血沉淀中提取人类或哺乳动物的基因组DNA（gDNA）。
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BunnyPure™去宿主试剂盒适用于从各类高宿主含量的生物液体样本（血液、痰液、唾液、肺泡灌洗液等）中选择性地高效去除宿主细胞和核酸，从而达到富集、纯化微生物的效果。兔牙生物科技采用独特的差异性裂解技术，能够特异性地去除宿主细胞和核酸，同时可保留样本中完整的细菌、真菌、DNA病毒、衣原体、支原体等临床密切关注的病原微生物，富集得到的微生物经DNA/RNA提取后可用于PCR、qPCR、mNGS等多种下游应用。本试剂盒能显著降低宿主背景，大幅度提升mNGS检测的准确度和灵敏度，具有良好的临床应用前景。
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